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      Thermo 反相色譜柱使用和維護說明

      日期:2019-04-23 18:23
      瀏覽次數:494
      摘要:1 、 適用鍵合相 反相色譜柱鍵合相包括:C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ、Cyano 1 等。 2 2 、 柱體積 色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算: V 為色譜柱柱體積(mL),r 為色譜柱內徑(cm),L 為色譜柱長度(cm)。 3 3 、 色譜柱柱效測試與保存 反相色譜柱出廠時都經過柱效測試,所用化合物為茶堿、鄰-硝基苯胺、苯甲酸甲酯、 苯乙醚和二甲苯,如有不同,以柱效報告為準。 在條件允許情況下,請對新色譜柱進行柱效測試。 反相色譜柱出廠時均保存在乙腈-水溶液中。 4 4 、 溫度 所有硅膠基質色譜柱使用溫度...
      1 、  適用鍵合相
      反相色譜柱鍵合相包括:C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ、Cyano 1 等。
      2 2 、  柱體積
      色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算:
      V 為色譜柱柱體積(mL),r 為色譜柱內徑(cm),L 為色譜柱長度(cm)。
      3 3 、  色譜柱柱效測試與保存
      反相色譜柱出廠時都經過柱效測試,所用化合物為茶堿、鄰-硝基苯胺、苯甲酸甲酯、
      苯乙醚和二甲苯,如有不同,以柱效報告為準。
      在條件允許情況下,請對新色譜柱進行柱效測試。
      反相色譜柱出廠時均保存在乙腈-水溶液中。
      4 4 、  溫度
      所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于 60℃。
      5 5 、  樣品
      * 好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解
      在初始流動相或極性相近的溶劑中。
      樣品溶液不應含有任何顆粒物,* 好使用 0.5μm 或更小粒徑的濾膜過濾。同時建議在
      色譜系統中使用在線過濾器。
      樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為水,樣品溶劑為甲醇),為達到較好峰形,
      需要降低進樣量(以 250x4.6mm 規格為例,小于 10μL)。
      6 6 、  流動相
      所有流動相,特別是含有緩沖鹽的流動相,* 好當日實驗當日配制;如果使用了前日配
      制的流動相,請確保流動相 pH 值沒有變化,并確保流動相沒有長菌。
      流動相的 pH 值取決于您的應用和色譜柱填料類型。我們建議在所有的色譜柱上都僅使
      用 pH 范圍為 2~8 的流動相( Hypercarb 可以使用 pH 為 1~14 的流動相);如果需要使用
      pH 更高(2~10)的流動相,請選用 Hypersil GOLD、Syncronis C18、Betasil C18 等色譜柱,
      并請盡量避免使用無機緩沖鹽。
      請盡量避免在常規流動相中使用很高比例的水(>95%)作為流動相,此類流動相僅適
      用于中等疏水的鍵合相,例如 Hypersil GOLD aQ、Aquasil C18、Syncronis aQ 等色譜柱。
      所有流動相都需使用 2μm 濾膜過濾。
      7 7 、  色譜柱安裝
      請小心操作色譜柱。
      不要摔、碰色譜柱,這樣會損壞色譜柱床,使色譜柱性能下降。
      使用合適的連接管路和接頭,確保色譜柱連接處死體積降到* 低(使用不銹鋼接頭時需
      要尤其注意)。我們建議使用 SLIPFREE  接頭,此接頭與 Thermo 色譜柱以及其他品牌色譜
      柱均完 美匹配。
      8 8 、  色譜柱平衡
      在進行分析之前,請使用至少 20 倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡。
      9 9 、  色譜柱保護
      對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,請盡量使用在線濾器或保護柱,如果可能,使
      用 SPE 小柱對樣品進行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。
      10 、  色譜柱 清洗
      常規清洗:
      在儲存色譜柱之前,請使用至少 20 倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱(去除
      緩沖鹽),再用更強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,反相色譜通常使用甲醇或乙腈),
      然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。
      清洗強保留污染物:
      使用如下試劑依次清洗色譜柱
      20 倍柱體積不帶緩沖鹽的流動相;
      20 倍柱體積甲醇或乙腈;
      20 倍柱體積異丙醇;
      20 倍柱體積正己烷或氯仿;
      20 倍柱體積異丙醇;
      20 倍柱體積甲醇或乙腈。
      11 、  色譜柱保存
      反相色譜柱,保存溶劑通常是含至少 30% 有機相的水溶液,也可在常規清洗后直接保
      存在有機相中。
      如果需要長時間儲藏,則需要使用較高比例的有機相(有機相比例至少大于 50%,但
      不建議使用純有機相)。
      注意:如果違反上述規程,可能使色譜柱失去保修。
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